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摘 要:构建重组真核表达质粒PHLCX Nflag3/小窝蛋白-1,并在293T细胞中表达.用PCR的方法扩增cDNA文库中的人小窝蛋白-1基因,连接在真核表达载体PHLCX Nflag3的短肽标签flag的下游,用限制性酶切和测序的方法鉴定;将重组质粒以脂质体法转染293T细胞,Western blotting法检测蛋白质的表达.结果显示,双酶切出现两个片段,分别与空载体和人小窝蛋白-1的cDNA分子质量大小相符,测序结果符合人小窝蛋白-1的cDNA序列;Western blotting显示构建的新载体能够在293T细胞中表达小窝蛋白-1/flag融合蛋白,表明已成功构建了能在293T细胞中高效表达小窝蛋白-1/falg融合蛋白的真核表达载体PLHCX Nflag3/小窝蛋白-1.


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关 键 词 :小窝蛋白-1;基因表达;293T细胞

中图分类号:Q782

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;1007―7847(2005)04―0331―05
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